用BamH Ⅰ切割一重组质粒DNA分子并从中分离纯化了两个DNA片段，一段长400bp，另一段长900bp。现在希望将这两个

片段重新连接起来，得到如图Q25.1所示的结果。

图025.1杂合基因的结构

于是将这两种片段混合起来，并在连接酶的存在下进行温育，分别在30min和8h取样进行凝胶电泳分析。令人惊讶的是，连接产物并非是理想中的1.3kb的重组分子，而是一种复杂的片段模式[图Q25.2(a)]。同时发现随着温育时间的延长，较小片段的浓度逐渐降低，大片段的浓度逐渐增加。如果用BamH Ⅰ来切割连接后的混合物，则起始的片段可以重新产生[图Q25.2(a)]。

从凝胶中分离纯化出1.3kb的片段，并取出一部分用BamH Ⅰ进行切割，以检查它的结构。正如预料的一样，出现了两个原始的带[图Q25.2(b)]。但是用EcoR Ⅰ切割另一部分样品，希望能够产生两个300bp和一个长度为700bp的核苷酸片段，然而，凝胶电泳的结果，令人惊奇[图Q25.2(b)]。

图Q25.2纯化DNA片段连接后电泳检测