题目内容
（请给出正确答案）
基因型为a+b-的4种E．coli菌株被分别标记为1、2、3、4，基因型为a-b+的另4种E．coli菌株被分别标记为5、6、7、8。将这两种基因型以所有可能的杂交方式混合，保温一定时间后，铺板确定a+b+重组子的频率。结果如下所示(M=许多重组子，L=少数重组子，O=无重组子)。
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在以上结果的基础上，确定每一菌株(Hfr、F+或F-)的性别。
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两株基因型分别为A+B-和A-B+的大肠杆菌(E.coli)混合培养后出现了野生型菌株，你如何证明原养型的出现是接合作用，转化作用或转导作用的结果。
给你下列菌株：菌株A.F+，基因型A+B+C+，
菌株B.F-，基因型A-B-C-，
问题：1． 指出A与B接合后导致重组的可能基因型。
2． 当F+成为Hfr菌株后，两株菌接合后导致重组的可能基因型。
对两个基因的噬菌体杂交所测定的重组频率如下：
a-b+×a+b-3.0%
a-c+×a+c-2.0%
b-c+×b+c-1.5%
试问：
假定你分离到一个E.coli的Thy-突变体，并推测有可能是thyA基因突变。请设计一个方案用PCR从染色体DNA扩增突变的thyA基因，测定突变的序列。(注：E.coli野生型的thyA基因的序列是已知的。)
欲将一真核生物的结构基因克隆后转移到原核生物(如E.coli)中进行表达，克隆时应注意哪些问题？
