重组极性杂合DNA模型中的异常分离现象最早是在酵母不同交配型A×a的杂交中发现的。合子减数分裂产
片段重新连接起来,得到如图Q25.1所示的结果。
图025.1杂合基因的结构
于是将这两种片段混合起来,并在连接酶的存在下进行温育,分别在30min和8h取样进行凝胶电泳分析。令人惊讶的是,连接产物并非是理想中的1.3kb的重组分子,而是一种复杂的片段模式[图Q25.2(a)]。同时发现随着温育时间的延长,较小片段的浓度逐渐降低,大片段的浓度逐渐增加。如果用BamH Ⅰ来切割连接后的混合物,则起始的片段可以重新产生[图Q25.2(a)]。
从凝胶中分离纯化出1.3kb的片段,并取出一部分用BamH Ⅰ进行切割,以检查它的结构。正如预料的一样,出现了两个原始的带[图Q25.2(b)]。但是用EcoR Ⅰ切割另一部分样品,希望能够产生两个300bp和一个长度为700bp的核苷酸片段,然而,凝胶电泳的结果,令人惊奇[图Q25.2(b)]。
图Q25.2纯化DNA片段连接后电泳检测
重组DNA技术中实现目的基因与载体DNA拼接的酶是()。
A.DNA Pol
B.RNA Pol
C.DNA连接酶
D.RNA连接酶
为了保证重组DNA分子在受体细胞中能够稳定地独立存在下来,通常用rec-r-m-表型的细胞株作为受体菌。
下列哪种说法是错误的( )
A.用纸色谱分离时,样品中极性小的组分Rf值大
B.用反相分配薄层色谱分离时,样品中极性小的组分Rf值小
C.用凝胶色谱法分离,样品中相对分子质量小的组分先被洗脱
下列哪种说法是错误的( )
A.用纸色谱分离时,样品中极性小的组分Rf值大
B.用反相分配薄层色谱分离时,样品中极性小的组分Rf值小
C.用凝胶色谱法分离,样品中相对分子质量小的组分先被洗脱